膿毒癥動物模型構(gòu)建方法總結(jié)
膿毒癥：
是一種嚴(yán)重的全身性炎癥反應(yīng)綜合征，是由感染引起的機(jī)體免疫系統(tǒng)過度激活和炎癥反應(yīng)失控的疾病。免疫系統(tǒng)反應(yīng)過于激烈，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)泛濫，從而引發(fā)全身性炎癥反應(yīng)綜合征。
常見膿毒癥造模方法：
1.細(xì)菌感染：通過注射細(xì)菌或其產(chǎn)生的細(xì)菌毒素來誘導(dǎo)膿毒癥模型。常用的細(xì)菌包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。
2.LPS誘導(dǎo)：脂多糖（LPS）是細(xì)菌外膜中的主要成分，具有強(qiáng)烈的免疫激活作用。可以通過注射LPS來誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)和膿毒癥模型。常用的給藥途徑包括靜脈注射、腹腔注射或氣道暴露。
3.盲腸結(jié)扎穿刺（CLP）：腹膜炎攻擊方法的一種，主要是通過手術(shù)方式將小鼠自身盲腸內(nèi)容物釋放到腹腔造成感染，從而構(gòu)建膿毒癥模型。
造模方法步驟
一、.盲腸結(jié)扎穿刺法（CLP）：
1.實(shí)驗(yàn)開始前禁食不禁水12h，小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉，待小鼠完全麻醉后仰臥位固定。
2.對腹部噴酒精和碘伏消毒，去除腹部表面毛發(fā)，使用手術(shù)刀在腹壁切2cm切口，暴露盲腸，在回盲瓣遠(yuǎn)端結(jié)扎盲腸，然后用針刺穿刺盲腸2次，輕輕擠壓盲腸，使少量的腸內(nèi)容物滲出，將盲腸復(fù)位，縫合腹膜和皮膚。
3.小鼠正常飼養(yǎng)6h后皮下注射30ml/kg生理鹽水和30mg/kg的頭孢曲松。
二、LPS誘導(dǎo)法 :
1.大鼠用卵圓鑷夾住其頸背部皮膚令其懸空，下腹部消毒。
2.緩慢腹腔注射內(nèi)毒素（大腸桿菌脂多糖，LPS，8-10 mg/kg，即230-250g的大鼠，每只注射2-2.5mg，約存活5-7天）制成大鼠膿毒癥模型。
3.造模后大鼠出現(xiàn)精神倦怠，躁動，呼吸、心率加快，腹脹，口鼻腔分泌物增多，豎毛，直腸溫度變化超過1℃等表現(xiàn)則視為造模成功。
結(jié)果案例
HE染色鏡下可見control組腸絨毛形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，未見出血
LPS組腸黏膜固有層下出血嚴(yán)重，可見炎細(xì)胞浸潤
IL-9組腸黏膜固有層下出血嚴(yán)重，肌層可見炎細(xì)胞浸潤
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