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動物關節炎模型

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一、實驗材料

牛二型膠原(北京博蕾德技術發展有限公司,20022)

CFA (北京博蕾德技術發展有限公司,7008)

二、實驗方法

1、將牛二型膠原溶于0.05M醋酸中,終濃度2-4mg/ml,溫和攪拌,4℃過夜。

2、將牛二型膠原醋酸溶液與CFA等量混合并乳化,乳化使用高速攪拌器,冰浴攪拌CFA和膠原溶液,一般攪拌3次,30000rpm/3min。保證乳化液滴入水中成團不散開。

3、初次免疫:小鼠尾根注射0.1ml乳液。從尾根部2cm處插入針頭,針尖距離尾根0.5cm注射。

4、二次免疫:第21天,小鼠尾根再次注射0.1ml乳液。從尾根部2cm處插入針頭,針尖距離尾根0.5cm注射。

5、一般在二次免疫后7-12天,模型組小鼠80%以上會出現關節炎癥狀。根據小鼠關節紅腫程度和活動狀態進行臨床評分。在實驗前和實驗后的第3、5、7、12天分別觀察記錄。

評分標準:

得分

發病情況

0

正常

1

腳部皮膚發紅,無明顯腫脹

2

輕度的踝關節、腕關節發紅、腫脹

3

踝關節或腕關節中度發紅腫脹

4

腳趾及關節紅腫嚴重,強直或畸形

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