大动物实验-动物试验中心-临床前研究「江苏美凤力医疗科技有限公司」

一．實驗方法：

方法一：6-OHDA誘導PD模型 

SD 大鼠適應一周后，腹腔麻醉；將麻醉后大鼠固定于大鼠腦立體定向儀上；剪開大鼠頭頂部皮膚、筋膜，充分暴露前囟、后囟點；調整門齒鉤平面使前囟與后囟在同一水平面上；以前囟（Bregma）點為原點，確定左、右兩側紋狀體注射位點： 

①左：前囟前1.0mm，矢狀縫左側 3.5mm，顱骨骨膜下 4.5mm； 

②右：前囟前 1.0mm，矢狀縫右側 3.5mm，顱骨骨膜下 4.5mm；用顱骨鉆沿注射坐標位點鉆孔， 以保證微量注射器進針時不碰到孔壁；微量注射器吸取 6-OHDA（注意避光）；首先按坐標位點注射 6-OHDA，注射劑量為4μl（濃度 2μg/μl），注射速度0.5ul/min，注射結束后留針 5min，然后緩慢退針；以前囟點為原點，重新定位第二個注射位點注射；最后一次退針后止血、消毒、針線縫合切口，將大鼠放入籠中，注意保溫。對照組造模具體步驟同上，把 6-OHDA換成生理鹽水。

方法二：MPTP誘導PD模型

MPTP大鼠腹腔注射20mg/kg/d，給藥7天。

二．實驗結果

2.1曠場檢測

2.2黑質TH染色