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美鳳力臨床前大動物實驗中心
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實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)是由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的發(fā)生于易感動物的自身免疫病,主要特征為中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)血管周圍單個核細(xì)胞浸潤和白質(zhì)脫髓鞘,其病理變化與多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)類似。由于MS樣本不易獲取,因此EAE動物模型是研究MS病理過程、發(fā)病機制的重要工具,在臨床神經(jīng)免疫學(xué)的研究中具有重要意義。EAE小鼠模型MOG35-55(髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白)誘導(dǎo)的EAE模型是一種廣泛使用的動物模型,用于MS等中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病與評估相應(yīng)的藥物藥效。在這個模型中,實驗動物通過注射髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白來誘導(dǎo)產(chǎn)生EAE,這些蛋白片段模擬了MS中認(rèn)為的自身抗原。構(gòu)建MOG誘導(dǎo)的EAE模型并利用其進行藥效評估通常涉及以下步驟:1、實驗動物的選?。哼x擇合適的品系,通常是易感于EAE的近交系,如C57BL/6小鼠。2、免疫誘導(dǎo):將MOG與佐劑(如完全弗氏佐劑,CFA)混合后,注射到動物體內(nèi)。還會添加PTX(Pertussis Toxin)等輔助成分以增強免疫反應(yīng)。3、臨床評分:在注射抗原后,定期對動物進行臨床評分,監(jiān)測其行為和運動障礙。評分系統(tǒng)通常包括對癱瘓嚴(yán)重程度的評估。4、組織學(xué)評估:在實驗結(jié)束時,通過組織學(xué)方法(如HE染色、LFB染色)檢查動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥和脫髓鞘情況。5、分子生物學(xué)分析:利用RT-qPCR等技術(shù)檢測相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平,了解免疫反應(yīng)的分子機制。6、數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析:對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,以確定MOG誘導(dǎo)的EAE模型的可靠性和有效性。7、治療干預(yù)實驗:在模型建立后,可進行各種治療策略的測試,如免疫調(diào)節(jié)藥物、抗炎治療等,以評估治療效果。南模生物現(xiàn)推出EAE小鼠造模服務(wù),部分實驗結(jié)果如下:按照標(biāo)準(zhǔn)方案使用MOG誘導(dǎo),小鼠在致敏后7-14天發(fā)病,表現(xiàn)出明顯的EAE癥狀,陽性藥芬戈莫德在該模型中表現(xiàn)出良好的治療效果。Fig1. MOG誘導(dǎo)方案Fig2. MOG誘導(dǎo)EAE模型的體重變化及臨床評分Fig3. MOG誘導(dǎo)EAE模型典型病理染色結(jié)果及組織學(xué)評分Fig4. MOG誘導(dǎo)EAE模型中脫髓鞘的病理染色結(jié)果及LFB評分Fig5. MOG誘導(dǎo)EAE模型脊髓中mIL17和mIL1β的表達(dá)情況
實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)是由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的發(fā)生于易感動物的自身免疫病,主要特征為中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)血管周圍單個核細(xì)胞浸潤和白質(zhì)脫髓鞘,其病理變化與多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)類似。
由于MS樣本不易獲取,因此EAE動物模型是研究MS病理過程、發(fā)病機制的重要工具,在臨床神經(jīng)免疫學(xué)的研究中具有重要意義。
EAE小鼠模型
MOG35-55(髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白)誘導(dǎo)的EAE模型是一種廣泛使用的動物模型,用于MS等中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病與評估相應(yīng)的藥物藥效。在這個模型中,實驗動物通過注射髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白來誘導(dǎo)產(chǎn)生EAE,這些蛋白片段模擬了MS中認(rèn)為的自身抗原。
構(gòu)建MOG誘導(dǎo)的EAE模型并利用其進行藥效評估通常涉及以下步驟:
1、實驗動物的選?。哼x擇合適的品系,通常是易感于EAE的近交系,如C57BL/6小鼠。
2、免疫誘導(dǎo):將MOG與佐劑(如完全弗氏佐劑,CFA)混合后,注射到動物體內(nèi)。還會添加PTX(Pertussis Toxin)等輔助成分以增強免疫反應(yīng)。
3、臨床評分:在注射抗原后,定期對動物進行臨床評分,監(jiān)測其行為和運動障礙。評分系統(tǒng)通常包括對癱瘓嚴(yán)重程度的評估。
4、組織學(xué)評估:在實驗結(jié)束時,通過組織學(xué)方法(如HE染色、LFB染色)檢查動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥和脫髓鞘情況。
5、分子生物學(xué)分析:利用RT-qPCR等技術(shù)檢測相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平,了解免疫反應(yīng)的分子機制。
6、數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析:對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,以確定MOG誘導(dǎo)的EAE模型的可靠性和有效性。
7、治療干預(yù)實驗:在模型建立后,可進行各種治療策略的測試,如免疫調(diào)節(jié)藥物、抗炎治療等,以評估治療效果。
南模生物現(xiàn)推出EAE小鼠造模服務(wù),部分實驗結(jié)果如下:
按照標(biāo)準(zhǔn)方案使用MOG誘導(dǎo),小鼠在致敏后7-14天發(fā)病,表現(xiàn)出明顯的EAE癥狀,陽性藥芬戈莫德在該模型中表現(xiàn)出良好的治療效果。
Fig1. MOG誘導(dǎo)方案
Fig2. MOG誘導(dǎo)EAE模型的體重變化及臨床評分
Fig3. MOG誘導(dǎo)EAE模型典型病理染色結(jié)果及組織學(xué)評分
Fig4. MOG誘導(dǎo)EAE模型中脫髓鞘的病理染色結(jié)果及LFB評分
Fig5. MOG誘導(dǎo)EAE模型脊髓中mIL17和mIL1β的表達(dá)情況
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