目的 觀察和分析斑馬魚體腎的微細(xì)結(jié)構(gòu)，并對其分泌的外泌體進行分離鑒定。
方法 應(yīng)用光學(xué)顯微鏡和 電子顯微鏡技術(shù)系統(tǒng)觀察斑馬魚體腎的顯微結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)，用納米顆粒跟蹤分析 （nanoparticle tracking analysis，NTA） 技術(shù)檢測外泌體粒徑大小。
結(jié)果 斑馬魚體腎緊貼并平行于脊椎，腎單位由腎小管和腎小體組成， 其中腎小管可細(xì)分為近曲小管、遠(yuǎn)曲小管及頸段 3 種類型，腎小體由腎小球和腎小囊構(gòu)成；經(jīng)高碘酸-希夫 （periodic acid-Schiff，PAS） 染色后，可見近曲小管富含糖原顆粒，其游離面有明顯的刷狀緣結(jié)構(gòu)。透射電子顯微 鏡下，在腎小管的管腔觀察到外泌體分布，上皮細(xì)胞游離面的胞質(zhì)有少量多囊泡體和大量的晚期內(nèi)涵體分布，腎小 管的頂端和腎小球足細(xì)胞中亦觀察到少量多囊泡體分布。通過CD9、CD63和TSG101免疫組織化學(xué)和免疫熒光檢測 顯示，多囊泡體及其外泌體在腎小管管腔的游離面高表達(dá)，在腎小體和管腔內(nèi)表達(dá)較弱。NTA和透射電子顯微鏡觀 察結(jié)果顯示，分離獲得的斑馬魚體腎外泌體呈茶托狀，粒徑眾數(shù)為144.4 nm，符合外泌體形態(tài)和直徑大小特征。
結(jié)論 斑馬魚體腎具有哺乳動物腎臟的典型結(jié)構(gòu)，為體內(nèi)的泌尿器官。腎小管具有分泌外泌體的能力，其形成是多囊 泡體向細(xì)胞游離面釋放到胞外的過程。本研究結(jié)果為水生實驗動物泌尿器官的功能研究及相關(guān)模型的開發(fā)應(yīng)用奠定 了形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。
閱讀原文：成年斑馬魚體腎的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其外泌體的分布鑒定.pdf
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