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miRNA

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小 RNA是 19~28 nt 的調控RNA分子,主要包括微 RNA(micro RNA,miRNA)和小干涉RNA(short interfering RNA,siRNA)兩類。 miRNAs是長片段RNA序列的一部分,同siRNAs一樣是比較短小的單鏈小分子RNA,一般來源于染色體的非編碼區域,由大約70 nt大小的可形成發夾結構的前體加工而來,它通過與其目標mRNA分子的3 端非編碼區域(3-untranslated region,3 UTR)互補導致該mRNA分子的翻譯受到抑制。

microRNA參與基因轉錄后調控活動,其中多數miRNA具有高度序列保守性、表達時序性和組織特異性。最近的研究表明miRNA參與各種各樣的調節途徑,包括發育、病毒防御、造血過程、器官形成、細胞增殖和凋亡、脂肪代謝等,具有重要的基因表達調控作用。

檢測方法

由于小分子RNA是一類很小的分子,部分小分子RNA表達水平可能很低,因而需要極為靈敏而定量的分析工具。常用的檢測方法有:

1. Northern blotting

2. 核糖核酸酶保護分析以及基于此方法的液相雜交。

3. RT-PCR也被用來檢測miRNA前體的表達水平, 其他基于PCR技術檢測miRNA的方法有:引物延伸法,就是在引物的5 末端加一個特異標記,可以定量測定低豐度的RNA含量;原位雜交技術(CISH,FISH)可以方便的檢測miRNA的時空表達的差異。

4. 芯片(microarrays)技術是一種較快的研究miRNA表達的方法。

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