大动物实验-动物试验中心-临床前研究「江苏美凤力医疗科技有限公司」

編者：資源增量是實驗動物科技發展的核心任務，是實驗動物對生命科學研究提供支撐和服務的基礎和保障。自上世紀80年代以來，我國老一輩實驗動物科學家苦心孤詣，在實驗動物資源研發工作中取得的多項開創新成果。

1988年《實驗動物管理條例》發布實施，在實驗動物工作規范化、法制化管理，保障實驗動物和動物實驗的質量，推動我國科技發展和民生保障等方面發揮了重要作用。特別是在實驗動物資源標準化、新品種/品系開發和動物模型創制方面，取得了令人矚目的成果。

為此，借“科技資訊”之窗，陸續推出我國實驗動物專家在此領域所作的工作及取得的應用成果。

SPF金黃地鼠種群建立及標準化研究

夏放

中國生物技術集團成都生物制品研究所有限責任公司

金黃地鼠(Golden hamster; Mesocricetus auratus)又稱敘利亞地鼠，金黃色，成年體重120-150克，染色體22對。目前世界各國飼養的不同品系的金黃地鼠,都是1 9 3 0年在敘利亞發現的同胞后代，由于同一祖先, 遺傳學上血緣相近。2003年成都生物制品研究所實驗動物中心首先在國內建立了SPF金黃地鼠種群，主要用于乙型腦炎減毒活疫苗制品生產，本文就SPF金黃地鼠種群建立及標準化做簡要介紹。

一、金黃地鼠生物學特性

1、一般特性

金黃地鼠毛色通常呈金黃色，成年體重雌性90g-150g，雄性80g-130g，尾長1.53cm，晝伏夜行動物，夜間8-11時行動最為活躍，白天基本都在睡眠，睡眠時全身肌肉松弛，室溫低于10度時出現冬眠；牙齒堅硬，雌雄都好斗，容易互相撕咬。金黃地鼠為雜食性動物，有很強的儲存食物的習性，口腔兩側各有1個頰囊，可將食物儲存于加囊內。

2、生理學特性及應用

金黃地鼠性成熟早,雌性60日齡，雄性75日齡即可配種繁殖，妊娠期15-17天,年產4-6胎,每胎產仔8-10只，哺乳期20-25天，出生體重2-3克，離乳體重25-28克，平均壽命2-3年。

金黃地鼠由于具有特殊的頰囊，常用于腫瘤學研究、血管生理學和微循環研究，適用于腫瘤移植、篩選、誘發和治療性研究、血管生理學和微循環研究的動物模型。此外金黃地鼠由于性成熟早，懷孕期短，動情周期準確，因而適用于生殖生理學研究。

二、金黃地鼠標準化研究

1、SPF金黃地鼠種群建立

2003年成都公司采用無菌剖腹產技術建立了SPF金黃地鼠種群，2004年規模化生產后開始用于乙型腦炎減毒活疫苗生產，2010年對該種群再次采用無菌剖腹產技術，并嚴格按照遺傳矩陣繁育模式，建立起720只SPF金黃地鼠組成的標準化核心種群。

2、SPF金黃地鼠的生物學特性研究

本公司分別在2006和2008年對SPF金黃地鼠進行了生長發育指標、各發育階段各臟器指標，繁殖生理指標以及主要生理生化指標進行了系統性研究。研究獲得的基礎數據填補了國內SPF金黃地鼠研究空白，為拓寬SPF金黃地鼠的應用范圍奠定了基礎。

3、SPF金黃地鼠排除了多種微生物和寄生蟲

從2003年開始，本公司每年進行6次SPF金黃地鼠種群的微生物和寄生蟲檢測，其中一次送澳大利亞Cerberus專業實驗室檢測，檢測的病毒達到18種，細菌16種和5種寄生蟲，檢測結果均為陰性，同時我們還專門送英國BioReliance實驗室檢測地鼠逆轉錄病毒和地鼠多瘤病毒，排除了這2種病毒，從而為疫苗生產提供了十分安全的動物原材料。

4、定期對SPF金黃地鼠種群進行遺傳檢測

從2008年開始，本公司定期對SPF金黃地鼠種群進行遺傳檢測，通過采用微衛星DNA標記技術和DNA測序技術，證明了SPF金黃地鼠種群的遺傳穩定性良好。同時由于建立了采用科學的繁育體系，十五年來SPF金黃地鼠繁殖性能一直保持穩定，平均產仔數保持在10只，成活率達到90%以上。

5、建立符合國際標準的SPF動物廠房設施

2003年本公司參照國外標準，建立了一棟1840平方米的SPF動物生產廠房，每個飼養單元都設立前室和后室，采用獨立的空調機組，10幾年來該廠房運行良好。

2009年為了通過WHO乙腦疫苗預認證，本公司公司新建了一棟3600平方米的廠房，專門用于SPF金黃地鼠保種和生產；該車間完全采用國際標準建設，整個廠房分為隔離器保種車間和規?；a車間，前者擁有28臺雙層不銹鋼隔離器，獨立的空調機組，進入隔離器空氣經過4次過濾處理，并配備UPS電源；生產車間共有6個獨立的飼養單元和空調機組，整個建筑對外窗戶完全密閉，飼養單元所有的門完全互鎖單向開啟，并有一套24小時監控系統和報警系統，任何溫、濕度和壓差異常都會及時報警，這種設計完全避免了交叉污染，從而從硬件為動物種群安全提供了保障。 2012年WHO專家現場檢查對該車間的設計和工藝布局給予充分肯定和認可。

6、完善的科學管理制度和SOP

本公司在2010年建立一套完善的QMS體系，該體系包括40多個管理文件，200多個SOP和記錄，這其中包括實驗動物質量控制程序、實驗動物福利方針、實驗動物風險管理程序、實驗動物中心HACCP以及應急處置預案等管理文件，動物繁殖育種、日常飼養管理和飼養間清場消毒以及高壓鍋操作等SOP；所有文件和SOP必須經QA審核簽發和定期修訂，記錄有嚴格的流水號。這樣可以保證日常的工作質量，一旦發生問題，具有可追溯性。對飼養人員進行嚴格培訓，熟悉和掌握實驗動物基礎知識和相關SOP，并考試合格后才能上崗；

7、健全的動物質量控制體系

本公司制訂有“實驗動物檢驗與簽發程序”，“實驗動物質量控制程序”和“核心群SPF金黃地鼠健康監測程序”等質量控制文件；公司QA負責SPF金黃地鼠種群抽樣和動物合格簽發放行，公司QC每季度按國家標準對核心群和生產群金黃地鼠種群抽樣檢測；每季度對地鼠飼料檢測營養成份，每批滅菌飼料做無菌檢驗，飼料實行QA簽發放行制度；每月對滅菌飲用水和墊料做無菌檢驗，每月監測飼養間微生物狀態，通過這一系列監控措施，確保SPF金黃地鼠種群處于受控狀態。

8、驗證與3C管理

本公司QA部門每年對動物廠房的空調機組，隔離器和高壓滅菌器等關鍵設備進行驗證，并對各種儀表定期校驗；一旦發生環境參數異常，設備異常和動物種群異常必須按規定申報NC（不符合性），廠房設施和關鍵設備更改或更換按規定申報CC（變更控制），對于申報的NC應有相應的預防糾正措施（CAPA），防止類似問題再次出現或發生；物品高壓滅菌必須按驗證后的模式裝載，記錄附上相應高壓設備打印憑條。

三、SPF金黃地鼠在科研和疫苗生產應用的重要意義

本公司從1978年開始使用金黃地鼠制造狂犬疫苗，2000年開始使用金黃地鼠制造乙型腦炎減毒活疫苗，2003年本公司建立了SPF金黃地鼠核心種群，2004年開始建立規?；a種群，從2005年開始，每年用于制造乙型腦炎減毒活疫苗的SPF金黃地鼠達到14萬只以上，生產量達到20萬只，十五年來已經累計供應乙型腦炎減毒活疫苗生產近200萬只，2013年本公司的乙腦減毒活疫苗制品成功通過WHO預認證，作為關鍵原材料的SPF金黃地鼠質量及質控體系也得到了WHO檢查官員的高度認可。近年來本公司的乙型腦炎減毒活疫苗年產量在6000萬人份，包括出口2000多萬人份，累計創造產值20多億，出口創匯近2億美元。此外SPF金黃地鼠還大量用于新疫苗的研發和省內外進行生殖生理學研究和其他動物模型。目前本公司正在進行無菌金黃地鼠研發，這將進一步拓寬SPF金黃地鼠的應用范圍，為開發人類疾病動物模型服務。

參考文獻

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[5]夏放，張水田，等。SPF金黃地鼠生物學特性研究。第八屆中國西部實驗動物年會論文集，2009年。

項目2014年國家項目：乙型腦炎減毒活疫苗國際預認證，項目編號：ZX09304316-001（2014-2016年）