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血生化檢測是對實驗動物血液內離子、脂類、蛋白質和各種酶等物質濃度的檢測。這些檢測項目的變化一般都與特定器官的功能有關，對評估實驗動物健康狀態以及驗證實驗動物造模是否成功等，都具有重要指導意義。由于血生化涉及項目較多，本號將分兩篇對其進行介紹。

絕大多數血生化檢測都可以用血清或肝素血漿樣本檢測，兩者的檢測結果會有差異，但這種差異并無臨床意義。然而，對于需要長期監測動物，相同指標應在監測周期內選擇相同樣本進行檢測。樣本的保存和抗凝劑的使用均應根據不同的檢測項目進行選擇。此外，樣本采集的質量可直接影響檢測結果。

對于大多數血生化項目，樣本應在采集后及時檢測，如不能及時檢測，3天內可4℃或冷凍（-20℃或更低溫度）保存；若保存時長超出3天，需冷凍（-20℃或更低溫度）保存，切忌將樣本反復凍融后進行檢測。但一些生化項目低溫保存也會影響其活性，如乳酸脫氫酶和谷草轉氨酶。

尿素、鉀、鈉離子避免使用含銨鹽類抗凝劑進行檢測；谷丙轉氨酶、肌酸激酶和總蛋白避免使用枸櫞酸鈉抗凝劑進行檢測。本文僅列出部分生化項的抗凝劑選擇，更多信息可參考WHO 2002年發布的《實驗室檢查中抗凝劑的使用》。

嚙齒動物尤其實驗大小鼠的血生化參考范圍，目前仍沒有建立標準參考。這與實驗大小鼠的品系眾多有關。已有文獻證明，不同品系的小鼠血生化會有差異。并且血生化的結果與動物的年齡和性別等因素相關。另外，由于不同機構使用的檢測方法不同，如干式生化分析儀和濕式生化分析儀，且使用試劑盒品牌不同、試劑盒檢測原理不同等，均會導致結果不同。這些因素都導致了實驗大小鼠的血生化標準參考范圍無法建立，目前可查到的參考范圍，均應根據內部情況進行參考。

蛋白質與肝膽功能檢測

1.   總蛋白（Total protein, TP）

血液等體液中的蛋白質種類眾多，但目前尚無一種常規檢測技術可以對體液中各種類型蛋白質總量進行準確測定。因此，臨床對體液中總蛋白質測定通常是假設所有的體液蛋白質均是單純蛋白質，且各種體液蛋白與化學試劑的反應性均一致。基于以上兩個假設，目前測定總蛋白最常用的方法有雙縮脲法和紫外分光光度法。血清中的總蛋白實際檢測的是除纖維蛋白原以外的成分，因此用血漿測定總蛋白較血清測定值偏高。

總蛋白的濃度主要反應肝臟合成功能和腎臟病變造成蛋白質丟失情況，可以用來判斷機體的水合狀態，脫水的動物總蛋白濃度會相對升高，即高蛋白血癥。當動物出現慢性肝臟疾病、骨髓瘤、自身免疫性疾病、慢性炎癥和感染等，會導致TP和球蛋白同時升高。

過度水合動物總蛋白濃度會相對降低，即低蛋白血癥，此時動物可能會出現浮腫、胸腔或腹腔積液。TP和白蛋白同時降低常見于肝功能受損導致蛋白質合成減少、營養不良、蛋白丟失過多、消耗增加等病理性因素。

2.   白蛋白（Albumin, ALB）

ALB由肝實質   細胞合成分泌，是血漿中含量最多的蛋白質，大部分動物的白蛋白占血漿蛋白的35%~50%。ALB是動物機體內重要的營養蛋白，參與維持內環境穩定，也是血漿中多種物質的主要轉運蛋白。當出現炎性疾病、漿細胞瘤、淋巴瘤、腎小球腎炎、營養不良、過度水合等，均會導致嚙齒動物出現血清白蛋白的降低；ALB升高則多見于脫水動物。

3.   球蛋白（Globulin，GLB）

球蛋白可以分為α球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白，大多數α球蛋白和β球蛋白由肝臟合成，γ球蛋白由漿細胞合成。α球蛋白中比較重要的兩種蛋白質分別是高密度脂蛋白和極低密度脂蛋白；β球蛋白包括補體（C3、C4）、轉鐵蛋白和鐵蛋白；γ球蛋白（即免疫球蛋白）包括IgG、IgD、IgE、IgA和IgM。

球蛋白的濃度一般通過總蛋白與白蛋白的差值來進行計算。球蛋白減少主要由于合成減少，如使用免疫抑制劑；球蛋白的增加多見于γ球蛋白，常見原因有慢性肝臟疾病、免疫性疾病、骨髓瘤等。

4.   白蛋白/球蛋白（A/G）

白球比應結合蛋白質指標進行分析，不同種類、品系、年齡、性別動物的白球比都有差異，很多病理狀態會改變白球比。當白蛋白和球蛋白均變化時，如出血導致白蛋白和球蛋白丟失、脫水導致球蛋白和白蛋白增加時，A/G比值將變化不大或保持在正常范圍內；當其中一個數值發生變化且占主導時，那么A/G比值將發生異常，如免疫球蛋白的產生導致A/G比值降低、免疫球蛋白缺乏導致A/G比值增高。在臨床上，ALB、TP、GLB和A/G比值應結合一起進行分析。

5.   谷丙轉氨酶（Alanine aminotransferase, ALT）

臨床上廣泛用來作為肝細胞損傷指標，也是中間代謝的關鍵酶。ALT主要存在于肝臟，但也廣泛存在于腎臟、心肌、骨骼肌、胰腺等組織中，這些組織出現損傷或壞死，也會導致血清ALT水平升高。由于ALT主要存在于細胞質，釋放比較容易，因此ALT升高可出現在組織損傷早期。血液中ALT的水平與肝損傷的嚴重程度不呈現相關性，ALT通常會在肝損傷12h內升高，并在24~48h內達到峰值，除非存在慢性肝損傷，一般情況下血清ALT水平會在幾周內恢復正常。比較特殊的是，豚鼠中ALT活性較低，因此ALT不適合用來作為判斷其肝損傷的標志物。

目前已發現在人類、大小鼠和狗中，ALT具有兩種亞型，分別為ALT1和ALT2，其中ALT1主要在腎臟、肝臟、脂肪和心組織中表達；而ALT2主要在肌肉和脂肪中表達。在小鼠中，ALT2被認為是脂肪變性的標志物。ALT亞型的區分可以更精準反應器官損傷情況，但目前ALT分型的檢測尚未廣泛應用在實驗動物檢測中。

6.   谷草轉氨酶（Aspartate aminotransferase, AST）

AST主要存在于肝細胞內，在正常大鼠血清中，細胞質中的AST約占總AST活性82%，線粒體膜上的AST約占總AST活性18%。此外，AST也存在于其他組織中，如心臟、骨骼肌、腎臟、胰腺等，這些組織損傷或壞死時，血清中AST也會升高。AST水平升高表示非特異性肝臟損傷，嚙齒動物在應激狀態或肌內注射也可能導致AST升高，AST升高應先檢查血清或血漿樣本是否溶血，結合肌酸激酶水平，排除是否為肌肉損傷導致AST升高，上述原因排除后，方可考慮為肝損傷導致AST升高。

7.   堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase, ALP）

ALP是一組在酸性條件下水解磷酸單酯類化合物的酶，在許多組織中存在其同工酶，尤其是肝膽系統、骨骼內的成骨細胞、軟骨內的成軟骨細胞、腸道細胞。ALP水平與嚙齒類動物的年齡及性別具有相關性，處于生長期的未成年動物ALP水平較高，隨著動物年齡的增長，ALP水平明顯降低；且大多數雌性動物ALP水平低于雄性動物。而ALP的病理性升高則常見于發生肝膽疾病、骨骼疾病、惡性腫瘤時的動物。

8.   γ-谷氨酰轉移酶（Gamma-glutamyltransferase, GGT）

GGT存在于許多組織中，包括腎臟、胰腺、腸道和肌細胞。GGT升高多見于動物發生肝臟疾病、膽管阻塞以及急性胰腺炎等。需要注意的是，GGT在腎臟中濃度最高，但發生腎臟疾病時，GGT的增加并不明顯，這是因為GGT會從受損的管狀上皮細胞中釋放到尿液中，而不是血液中。

9.   膽紅素（Bilirubin, Bil）

膽紅素是一種不可溶性分子，由脾臟內巨噬細胞降解血紅蛋白產生，是各種含血紅素蛋白中的血色素在一些系列酶作用下的降解產物，與脂類的消化吸收及黃疸形成具有重要關系。膽紅素在光照下分解，因此，樣本應避光保存以保證結果準確性。當動物出現膽汁運輸障礙或腸道吸收不良時，會導致膽紅素降低；當動物出現溶血性疾病導致紅細胞破壞或內出血時，可使膽紅素含量增高。

10.  膽汁酸（Bile acids, TBA）

嚙齒動物的膽汁酸代謝與人類有所不同，大小鼠的膽汁酸以膽固醇為原料在肝細胞中合成，由肝源性分子組成，并主要與牛磺酸結合。膽汁酸可以促進脂類的消化吸收、調節膽固醇的代謝以及促進膽汁分泌。當動物出現肝功能受損、膽道阻塞等疾病時，均會導致膽汁酸水平增加。

腎臟功能檢測

1. 尿素（Urea）

尿素是哺乳動物蛋白質代謝的主要終末產物，可自由濾過腎小球，當腎實質受損時，腎小球濾過率下降，血尿素濃度會升高，因此可以通過測定尿素水平來評估腎功能。需要注意的是，產尿酶菌（如金黃色葡萄球菌/變形桿菌屬/克雷伯菌屬）污染的血液樣本可導致尿素分解，導致尿素水平下降，為避免這種情況，樣本采集后應及時進行檢測，如不能及時檢測，應將樣本放置在冰箱冷藏中保存。另外不同性別及年齡差異，也會影響尿素水平，隨著動物年齡增長，尿素水平會呈現下降趨勢。尿素的增加多見于高蛋白飲食、脫水以及腎功能衰竭等。

2. 肌酐（Ceatinine, Crea）

血肌酐經腎小球濾過進入原尿，并且不被腎小管重新吸收，機體內肌酐應保持恒定，因此測定血肌酐水平可以用來評估腎功能。但是和尿素一樣，肌酐不是腎功能的準確指標，當腎功能損傷近75%時，方可引起血肌酐水平升高。肌酐降低則多見于動物營養不良、貧血等。

3. 尿酸（Uric acid, UA）

尿酸是嘌呤堿基代謝產物，主要存在于肝臟中，小部分可經肝臟隨膽汁排泄。尿酸可自由濾過腎小球，也可腎小管排泄。因此，排除外源性尿酸干擾，血尿酸可反映腎小球濾過功能和腎小管重吸收功能。當機體出現急性或慢性腎炎、多發性骨髓瘤等均會導致UA升高；肝臟壞死、肝功能衰竭等病理原因則會導致UA降低。