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實驗動物病理取材步驟以及注意事項,附不同臟器取材細節

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在病理實驗中,對不同部位的組織進行取材是實驗順利進行的首要步驟,也是獲取有效數據的關鍵。接下來,我們將詳細了解病理實驗動物取材的步驟及注意事項。

01、取材前準備
需要準備的取材用具:動物固定板、外科手術刀、鑷子、解剖剪刀、濾紙紗布、固定容器、固定液以及實驗記錄本等。若需要對臟器進行稱量或拍照,還需準備天平、尺子和標簽。

所需的試劑有:麻醉劑、固定液和生理鹽水。

廢物存放要求:應使用有明顯標志的黃色垃圾袋來存放動物尸體和廢棄臟器,銳器盒則用于存放廢棄的針頭、刀片和注射器等。

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02、取材基本要求

動物麻醉及處死過程應迅速進行,這既符合動物倫理要求,也能避免動物組織死后自溶,從而影響實驗結果的準確性。

在取材時,應對動物模型的外表和臟器進行肉眼觀察,并做相應的實驗記錄。

取材人員應對所取樣本有充分了解,取材過程要迅速。對于易自溶的組織,如腸道和腺體,應優先處理。

取材時使用的剪刀和刀片應保持鋒利,鑷子盡量避免使用齒鑷,夾取臟器時應用無齒鑷夾住其周圍的結締組織。

如無特殊要求,所選組織應盡量包含臟器的全部層次或重要結構。若相同器官需要多次取材,選材部位應盡量保持一致。

剖檢應在設有解剖臺的解剖室內進行,小動物可在大小適宜的搪瓷盤內進行。剖檢完成后,應及時對用具和場地進行嚴格消毒,特別是處理死于傳染病的動物尸體時,要嚴防病原擴散。

動物尸體應及時收入冰柜,并按照醫療垃圾的處理方法進行妥善處理。

*注:動物尸檢時,常被忽視的體表檢查也非常重要。例如,四肢水腫可能提示動物生前患有心臟、肝臟、腎臟或關節炎癥等疾病;尾巴壞死可能是外傷(如夾傷、打斗等)或注射時損傷血管導致血液供應不足造成的;天然孔如口腔、鼻孔周圍有血液,可能是食道或上呼吸道損傷;肛門周圍污穢則可能提示動物生前有腹瀉現象,多患有腸道疾病等。

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03、病理實驗動物各臟器取材細節
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04、注意事項

1. 若發現肉眼可見的病變,應認真觀察并準確選取病變部位的組織,切勿漏取,以確保全面反映組織病變的全貌。同時,需要由表及里地觀察病變狀況,測量重量、記錄部位和體重等。

2. 根據實驗方法、目的以及病變情況,應盡量多取材,并確保所選取的組織材料包含各臟器的主要結構部分。

3. 應避免選取因解剖失誤造成的凝血塊和壞死組織等。

4. 在取病理材料時,應避免壓擠(以免組織變形)、刮抹(以免組織缺損)和沖洗(以免紅細胞和其他細胞吸水腫脹破裂)。

5. 所取的材料應盡量保持肉眼標本的完整性,厚度不宜過厚或過薄。建議選用1.5cm×1.5cm×0.5cm的取材規格。

6. 在組織分離時,應注意鈍性分離,避免用器械直接夾傷組織。如果臟器上附有血液、黏液等污物,應用生理鹽水沖洗后再進行固定。如果血液過多導致固定液變色,應及時更換固定液。

7. 胃腸標本在取材前應將內容物沖洗干凈。

8. 對于肝腎等較大的臟器,可以先將其切成較薄的塊狀組織進行固定,或者稍固定后再切成片狀繼續固定。

9. 對于垂體、腎上腺、甲狀腺等小組織,應平鋪于濾紙上再進行固定。

05、取材后病理分析注意事項

1)常規HE染色時,切片厚度應根據不同組織類型進行調整。

2)在光鏡下觀察時,應首先區分有無特異性病變及其范圍,然后由臟器的一端向另一端進行整體觀察和描述。

3)觀察小動物臟器時,應注意有無腫大、增生等現象。可以使用10倍鏡由一端開始計數該臟器包含的10倍鏡鏡頭視野數,或計數整個切片中的功能單位數。

4)對于大動物的臟器,如果懷疑有腫大、增生等情況,可以使用40倍鏡頭計數每一視野中的細胞或功能單位數。

5)在確定病灶大小后,應使用40倍鏡頭進行觀察。可以先將鏡頭的圓周與觀察的病灶邊緣相切,再觀察該病灶在這一視野中的比例。

6)在計算實驗動物腫瘤發生率時,不論腫瘤是良性還是惡性,均應計入腫瘤發生數,并計算腫瘤發生率。

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