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概述:DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因表 達。DNA甲基化通常抑制基因表達,去甲基化則誘導了基因重新活化和表達。這種DNA修飾方式在不改變基因序列的前提下實現對基因表達的調控。
概述:在人類基因組中,估計平均每1,000 個堿基對就有1 個SNP,估計其總數可達300 多萬個。SNP 分布不均勻,在非轉錄序列中要多于轉錄序列,絕大多數位于蛋白的非編碼區。通常情況下是一種二等位基因的變異,多為轉換,即一種嘧啶堿基換為另一種嘧啶堿基,或一種嘌呤堿基換為另一種嘌呤堿基,轉換與顛換之比為2:1。SNP 在CG 序列上出現最為頻繁,而且多是C→T,因為CG 中C 即胞嘧啶常被甲基化,自發脫氨后即變為胸腺嘧啶。
概述:盡管化學合成是最貴的方法,但是卻是最方便的一種方法。其主要的缺點包括價格高,定制周期長,特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高,為一個基因合成3—4對siRNAs 的成本就更高了,比較常見的做法是用其他方法篩選出最有效的序列再進行化學合成。
概述:microRNA參與基因轉錄后調控活動,其中多數miRNA具有高度序列保守性、表達時序性和組織特異性。最近的研究表明miRNA參與各種各樣的調節途徑,包括發育、病毒防御、造血過程、器官形成、細胞增殖和凋亡、脂肪代謝等,具有重要的基因表達調控作用。
概述:實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環后產物總量的方法,最后通過標準曲線(內參)對未知模板(待測樣品)進行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數存在線性關系,所以成為定量的依據。
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