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實驗動物的腫瘤體積怎樣測量才是正確的,看看你測量對了嗎?

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說到腫瘤藥物研發,大家首先聯想到是開始在“小白鼠”身上進行的試驗,然后再用到人身上。那么,在小白鼠體內誘導生成的腫瘤,和人類的腫瘤是一模一樣的嗎?

那么帶著這個問題,接下來讓我們一起來看看實驗動物腫瘤體積的精確測量方法。首先,選擇合適的實驗動物接種腫瘤細胞。

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一、選哪種實驗動物接種腫瘤細胞?

在腫瘤學實驗中,常用的瘤株主要分為兩大類:鼠源瘤株與人源瘤株。鼠源瘤株可以生長在小鼠體內,可直接在小鼠上進行實驗研究。而人源瘤株不能在正常小鼠體內生長,需借助免疫缺陷小鼠(如裸鼠)作為實驗對象,以模擬人體環境。


然而,腫瘤的生長形態多樣,包括球形、橢圓形、長條形甚至不規則形狀,給測量腫瘤體積增加了難度。所以,在活體動物中描述腫瘤大小往往為估算值。

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二、具體的計算公式

對于離體移植瘤,最接近真實數據,具體測量方法是通過體外3D打印技術重現瘤體形態后,再采用排水法進行測量,但這種方法的成本高且周期長,不適合頻繁測量腫瘤體積。

目前,針對動物模型上的腫瘤體積測量,位于動物體表的實體瘤大小直接使用游標卡尺進行測量。而對于位于體內的實體瘤,可通過動物活體熒光顯像、micro-CT(微型計算機斷層掃描)和MRI(磁共振成像)等方法進行測量。也可通過安樂死動物后進行解剖尸檢,直接測量腫瘤尺寸,這種方法雖然具有破壞性,但能提供最為直接和準確的體積數據。


卡尺測量法

上文提到,排水法測量得出的數據最接近真實體積。這一觀點在加利福尼亞大學洛杉磯分校醫學院的Mary M. Tomayko與C. Patrick Reynolds于1989年發表的論文中有提到。他們采用橢球體模型(公式為V=π/6×L[長徑]×W[短徑]×H[高])計算所得的腫瘤體積,與通過排水法測量的體積最為接近,相關系數達到了r=0.93,充分證明了該計算方法在體積估算中的準確性和可靠性。

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在采用此方法測量前,首要要判斷腫瘤的長徑與短徑,確保測量時長短徑處于垂直方向。皮下腫瘤的測量,具體操作如下:使用游標卡尺長度(L,尺寸最長的維度),寬度(W,尺寸較短的維度,垂直于長度所在平面,需確保測量時卡尺與動物身體平面保持平行,高度(H,腫瘤上邊界至動物身體表面之間的垂直距離)。通過上述三個維度的測量,可以為后續腫瘤體積的計算提供可靠數據。


在測量的過程中,腫瘤塊的長度L和寬度W可以很好地測量出來,但是腫瘤的高度由于另一側從皮膚長出,不太好測量。 


在實際應用中,因為π=3.14,π/6=0.52,所以我們在不少研究中看到腫瘤計算公式為V=0.52×L×W2,也有實驗室用較為簡化的公式:V=(W2×L)/2。

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03、注意事項

減少操作員差異:不同人使用同一游標卡尺進行測量時,可能會有2mm的誤差,建議在整個測量過程中由同一位操作員完成,以減少誤差。

統一測量基準:同一位測量者,如果每次選取的腫瘤長度和寬度的不一致,也會有誤差。建議在每次測量時都選擇相同位置測量,確保測量的一致性和準確性。

原位與轉移腫瘤模型的特殊性:上述提到的腫瘤體積計算公式主要適用于體表或易于直接測量的腫瘤。對于體內原位或轉移腫瘤模型,由于直接測量困難,通常采取分期分批安樂死動物的方式,取出瘤體后進行測量。以至于每次實驗需要消耗大量的動物以便在不同的時間點進行比較。


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